叶绿素吸收什么光
与大多数动物不同,不会“走动”的植物无法通过迅速改变自己的空间位置来寻找食物。为了获取用于生长发育等生命活动的能量,植物需要利用来自太阳的光能。这种将光能转化为植物可以利用的能量的过程,被称为光合作用。捕获光能是光合作用的第一步。植物用于捕获光能的“工具”,是能吸收可见光的色素。这些色素主要存在于植物的叶片中,可以分为两类:呈黄色至橙色的类胡萝卜素,含量较少。叶绿素,含量较多,是光合作用捕光的“主角”。
叶绿素吸收什么光
叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,是一类含脂的色素家族,位于类囊体膜。叶绿素吸收大部分的红光和紫光但反射绿光,所以叶绿素呈现绿色,它在光合作用的光吸收中起核心作用。
光合特性
叶绿素的可见光波段的吸收光谱,在蓝光和红光处各有一显著的吸收峰,吸收峰的位置和消光值的大小随叶绿素种类不同而有所不同。叶绿素a最大的吸收光的波长在420-663nm,叶绿素b的最大吸收波长范围在460-645nm。
叶绿素a和叶绿素b及衍生物的吸收光谱表明,它们在红光区(620~700nm)和蓝紫区(400~500nm)出现了较深的黑带,也就是说,这些光线被叶绿素强烈吸收;而在绿光区(520~580nm)没有黑带,即未被吸收,这也正是叶绿素是绿素的原因。戴荣继等人采用紫外检测器和二极管阵列的三维检测器多次尝试后,最终确定叶绿素a的发射波长为433nm,激发波长为664nm;叶绿素b的发射波长为469nm,激发波长为670nm。
叶绿素b存在于高等植物、绿藻、眼虫藻、管藻中,最大吸收光带在红光和蓝紫光。
叶绿素提取分离方法
1、提取
叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里,室温保持在25℃。提取步骤如下:
(1)取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。
(2)将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。
(3)将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然后轻轻地旋转,同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水溶杂质被丢弃,只剩石油醚溶液。
(4)将石油醚溶液用蒸馏水再次净化后,用含有石油醚和0。01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最后得到黄绿色悬浮液。
(5)用无水硫酸钠对悬浮液进行干燥,并将其渗入到3cm厚的蔗糖粉末制成柱中,然后用石油醚清洗沉淀的色素去掉类胡萝卜素,使之只含有天然的叶绿素。
(6)含有天然叶绿素的蔗糖柱分两层,绿层有4-10mm的叶绿素b层,另一蓝层为2-6mm的叶绿素a层。
(7)将位于蓝层正中的部分(约占蓝层的一半)放入醚中,对此悬浮液进行过滤、洗提,用蒸馏水清洗,用硫酸钠干燥,再用器皿进行过滤后,得到叶绿素a。
(8)将(6)中的绿层中间部分移出,迅速放入醚中过滤、洗提,制成叶绿素b醚溶液。
2、分离
色谱法是一种很好的分离纯化、鉴定有机化合物的重要方法,尤其是在微量分析中应用的更是广泛。果蔬中色素主要包括脂溶性的胡萝卜素、叶黄素、叶绿素和水溶性的花青素。在提取实验时,我们可以利用相似相溶的原理把水溶性的花青素滤掉,继而可以利用薄层色谱、柱色谱、高效液相色谱对胡萝卜素、叶黄素和叶绿素进行分离,由于这三种色素的极性依次减弱,可以适当地选择单一的有机溶剂或者不同配比的混合溶剂作为展开剂和洗脱剂,确定最佳的优化分离条件。