蛋白质双缩脲反应颜色
蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。蛋白质的双缩脲反应(实验原理简单、比较容易操作。)是一个反应原理较为简单,较为容易进行的实验。
蛋白质双缩脲反应颜色
蛋白质分子与双缩脲试剂能够产生紫色的颜色反应。
是因为蛋白质分子中含有肽键。双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。
蛋白质双缩脲反应详细的实验步骤
①取1支试管,加入少许尿素,试管口放一片湿润的石蕊试纸,加热至试纸变为蓝色,且试管内物质蒸干后停止加热。冷却后用吸量管加入10%的NaOH试剂1ml摇匀,再加入2~4滴1%的CuSO4,摇匀观察溶液颜色变化。
②取1支试管,加入稀释后的鸡蛋清。用吸量管加入10%的NaOH试剂1ml摇匀,再加入2~4滴1%的CuSO4,摇匀观察溶液颜色变化。(需要准备:药匙、吸量管、洗耳球、试管夹、试管架、尿素、NaOH、CuSO4)
自己在家中进行实验的话,可以用鸡蛋清的稀释液进行蛋白质的检测。在实验过程中需要注意的是,配制双缩脲试剂时,应避免CuSO4过量生成蓝色的Cu(OH)2,其颜色会对结果产生干扰。有条件的可以尝试用氨基酸和双缩脲进行反应。
扩展资料
双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。
它是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。会遇到蛋白质显紫色。
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。
双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾,会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。